描述:THOMA細(xì)菌計數(shù)板一個計數(shù)室實質(zhì)上是一種顯微鏡下將砌體蝕刻其表面上讓使用者能夠數(shù)出細(xì)胞或懸浮在上面的其他粒子。
品牌 | 其他品牌 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,食品,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥 |
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產(chǎn)品名稱 | THOMA細(xì)菌計數(shù)板 | 產(chǎn)品規(guī)格 | HD-825 |
應(yīng)用 | 細(xì)菌計數(shù) |
產(chǎn)品名稱:細(xì)菌計數(shù)板 產(chǎn)品規(guī)格:HD-825
THOMA細(xì)菌計數(shù)板介紹
一個計數(shù)室實質(zhì)上是一種顯微鏡下將砌體蝕刻其表面上讓使用者能夠數(shù)出細(xì)胞或懸浮在上面的其他粒子。計數(shù)室用于血液分析(白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板),細(xì)菌、真菌孢子、精葉、尿微粒,蟲卵等。計數(shù)室如果用于血液分析時,會被稱為。
所有計數(shù)室在他們的設(shè)計中使用相同的基本原則。一個已知厚度的樣品液(血液、尿液、細(xì)胞懸浮等)是在一個已知模式的網(wǎng)格線上被試驗。因此通過數(shù)包含在網(wǎng)格立體的細(xì)胞數(shù)量可容易計算出來。已知厚度的樣品的創(chuàng)造是通過計數(shù)室中心區(qū)域的滑動網(wǎng)格和高蝕刻外的部分之間的高度差。作為一個玻璃蓋被放在外面的部分 毛細(xì)管差距是由于玻璃片的底部和計數(shù)室的中心區(qū)域所產(chǎn)生的。計數(shù)室的蓋片比常規(guī)顯微鏡厚,因為他們必須足以克服表面張力的一滴液體,同時也不向下或向上(這將改變已知深度),但不太厚,因為這將影響樣品數(shù)。
計數(shù)室可以被鑒定為全面單一網(wǎng)格(中央?yún)^(qū)域沒有分部)或雙網(wǎng)格(分開的中部地區(qū))。
它們可以在視覺識別(反射)涂層標(biāo)的中央或者是被涂層區(qū)域。
一個金屬化的(有時叫做“亮線")計數(shù)室有一銠涂層在網(wǎng)格上。在顯微鏡下,通過改變的對比,顏色是可能的改變的,所以計算網(wǎng)格可以選擇亮或暗的顏色。
一個未包裝的計數(shù)室有計數(shù)網(wǎng)格直接蝕刻在玻璃上。
銠涂層的計數(shù)室,比普通類型的有更多的優(yōu)點。灌裝更加簡單,樣品溶液形成更為清晰在深色背景下。
顯微鏡的調(diào)整更少出錯并且在線和背景的更好的對比下,界線顆??梢钥焖僮R別。薄膜厚度保證在嚴(yán)格的限制下——光的傳播的保證其價值。
之后,銠涂層被加熱來硬化金屬并且長久性的粘合在玻璃表面。
金屬化的區(qū)域除了普通計數(shù)室以外并不需要特別的條件。
THOMA細(xì)菌計數(shù)板準(zhǔn)確性
所有Auvon的計數(shù)室制造符合英國標(biāo)準(zhǔn)BS748。這個標(biāo)準(zhǔn)制定了詳細(xì)的要求并且計數(shù)室用于大多數(shù)血液分析。以下幾點說明在科學(xué)的精度和標(biāo)準(zhǔn)下的要求非常高:
A)測量區(qū)域的深度低于外部支持(已知的深度)必須在±0.001毫米。
B)玻璃蓋必須地支持和拋光光學(xué)平面和共面在測量區(qū)域±0.001毫米范圍內(nèi)。
C)玻璃片的光學(xué)工作為了準(zhǔn)備充填、玻璃片底部和測量表面之間的距離在±0.001毫米范圍內(nèi)變化。
使用計數(shù)室
遵循一般指令。要求做出更詳細(xì)的說明和信息關(guān)于如何數(shù)計算量特指計數(shù)室的具體信息和說明書。
準(zhǔn)備
準(zhǔn)備計數(shù)室,其磨合表面用鏡片紙仔細(xì)清洗。鋼化玻璃也清洗的。
滑動玻璃蓋
外部區(qū)域滑坡形成的蒸餾水和鋼化玻璃是輕輕推到計數(shù)室,前面的前邊緣放置在鋼化玻璃是對稱的區(qū)域被計數(shù)的區(qū)域。
必須小心:鋼化玻璃是很容易破碎的。
干涉(擾)線的形成(牛頓環(huán))之間的外部支持和鋼化玻璃蓋片玻璃顯示正確的位置。
反饋計數(shù)室
采取混合均勻的移液管并且處理初的幾滴溶液。把移液管的外部擦干并且把它放置在一個特定的角度直到小液滴從移液管的一端出現(xiàn)。然后把這液滴放在玻璃片和計數(shù)室的中間。由于毛細(xì)管作用鋼化玻璃和計數(shù)室,這兩項之間的差距被填滿。在溶液溢出的邊緣剖面、尖針必須清除。如果任何氣泡是可見的,或者如果在液體溢出的邊緣和其他的凹槽,計數(shù)室必須清洗而且必須從頭做起。
計數(shù)
這些帶電的計算腔體然后放在顯微鏡階段和計算網(wǎng)格帶進(jìn)低功率聚焦。必須非常小心的目標(biāo)和更高的力量,因為點票工作更厚的商會是比傳統(tǒng)滑動。你可能損壞計數(shù)室或一個客觀的鏡頭,如果你不小心。
顯微鏡使血細(xì)胞計數(shù)與受力階段應(yīng)該的,如果可能的話,可以使用。照明的顯微鏡是重要的,因為太亮防止裁決被容易地看到它。光線可以減少通過瞳孔膜直到裁決的背景突出出來。
細(xì)胞/微粒數(shù)足夠應(yīng)該稀釋,所以不會互相重疊,應(yīng)均勻分布。執(zhí)行計算確定需要認(rèn)識到想要的細(xì)胞放大/粒子。
計算細(xì)胞的數(shù)量
計數(shù)應(yīng)均勻地分布在計算區(qū)域,并且這是推動改進(jìn)的計數(shù)板和計數(shù)板裁決了廣場被分成塊,采用三重判斷。擁有100平方數(shù)分這筆錢到100年(數(shù)量的方格計算在內(nèi)),取得平均每平方。乘稀釋并且除以1/4000(的立體容積每個小方是1/10 - 1/20 1/20倍x 1/4000mm3)。到達(dá)的人數(shù)這個計算是細(xì)胞的數(shù)量每立方毫米的原始稀釋液體。下面的公式提供了一種方便的方法進(jìn)行了描述。
(D×N)/(Sx K)
地點:D =稀釋系數(shù) N =數(shù)量的兩種 / K =體積為每個小廣場
(1/4000 mm3為一種改進(jìn)的計數(shù)板 0.1毫米深腔)數(shù)量的方格S =數(shù)
例如:當(dāng)D = 100,N = 1350 S = 100
然后(100×1350)/(100×4000)= 5400000細(xì)胞每立方毫米
計數(shù)大細(xì)胞(如白細(xì)胞)
在計算時是很常見的細(xì)胞大所有的細(xì)胞數(shù)包含在1毫米×1毫米測量。進(jìn)行了統(tǒng)計,繼續(xù)和以前一樣,但在這種情況下,
價值“K"的能力將1/10的各大廣場是1 * 1 * 1/10 = 1/10mm3。
一個小的K值類型不同的裁決廣場下面給出:
改進(jìn)計數(shù)板(0.1毫米細(xì)胞深度)K = 1/4000
計數(shù)板(0.1毫米細(xì)胞深度)K = 1/4000
特計算池(0.1毫米細(xì)胞深度)K = 1/250
Thoma(0.1毫米細(xì)胞深度)K = 1/4000
富克斯羅森塔爾(0.2毫米細(xì)胞深度)K = 1/80
Helber細(xì)菌(0.02毫米細(xì)胞深度)K = 1/20000
馬拉塞(0.2 毫米細(xì)胞深度)K = 1/2000 精葉不育Z3BC1B(0.01 細(xì)胞深度)K = 1/10000
清洗計數(shù)室
完成實驗后的計數(shù)玻璃片硬鋼立即移除,并且去除的計數(shù)室和鋼化玻璃如有必要用溫和的洗滌劑溶液來清洗干凈。
當(dāng)一個干膜必須從計數(shù)室或者玻璃片上移除時,1%的鹽酸溶液可能要小心使用。
接下來計數(shù)室是用軟布或與丙酮清洗。
清洗吸量管
吸量管在使用后必須用生理鹽水(0.9%氯化鈉)以及水、醇、醚清洗??諝馔ㄟ^根吸管輕輕蒸發(fā)后,乙迷來使吸量管干燥。應(yīng)該在血凝加樣器,它可能被0.3%胰液素消化在1%在稀釋的鹽酸中。一個小型探測器或珠寶商可以用來清除沾著血跡的鉆,為了防止損壞電紡絲。破碎的小部分吸量管不能用作實驗會產(chǎn)生相當(dāng)大的誤差,估計會影響的血液細(xì)胞濃度,由于其毛管部分的針。因為更大的稀釋,誤差將較大。